مستنبت اللمفاويات المزيجة: دوره في تقييم التوافق المناعي

اللمفاويات نوع من خلايا الدم البيضاء، وتؤدي دورًا أساسيًا في الدفاع عن الجسم. وتشمل الخلايا التائية التي تستطيع التعرف إلى اختلافات مناعية بين خلايا الشخص وخلايا شخص آخر. أما كلمة مستنبت فتعني أن الخلايا تُحفظ خارج الجسم، داخل وسط يوفر الظروف اللازمة لبقائها وتفاعلها مدة محددة.

عند مزج خلايا من شخصين، قد تتعرف الخلايا التائية لدى أحدهما إلى جزيئات موجودة على خلايا الآخر باعتبارها غير ذاتية، فتتنشط وتبدأ بالتكاثر. يقيس الاختبار هذه الاستجابة، أو بعض العلامات المرتبطة بها. وهو بذلك اختبار وظيفي لسلوك الخلايا، وليس تحليلًا لعددها، ولا مزرعة للكشف عن بكتيريا أو فطريات في الدم.

تحمل الخلايا علامات مناعية تُسمى مستضدات الكريات البيضاء البشرية، ويُشار إليها باختصار HLA. تساعد هذه العلامات الجهاز المناعي على التمييز بين خلايا الجسم وما هو غريب عنه. وقد يؤدي اختلافها بين المتبرع والمتلقي إلى استجابة مناعية تؤثر في نجاح الزراعة، مع اختلاف أهمية كل نوع من المطابقة بحسب نوع الزرع.

استُخدم مستنبت اللمفاويات المزيجة تاريخيًا لتقدير جانب من هذا الاختلاف، وخصوصًا الاستجابات المرتبطة بمستضدات التوافق النسيجي من الصنف الثاني. لكن التفاعل داخل طبق المختبر لا يمثل جميع الأحداث التي تقع داخل الجسم؛ إذ تتدخل أيضًا الأجسام المضادة، وحالة المريض، ونوع النسيج المزروع، والأدوية المثبطة للمناعة.

الرفض وداء الطعم حيال المضيف

في رفض الزرع، يهاجم جهاز المتلقي المناعي النسيج المزروع. أما في داء الطعم حيال المضيف، فقد تهاجم الخلايا المناعية المنقولة مع الطعم أنسجة المتلقي، ويبرز ذلك خصوصًا بعد زراعة الخلايا الجذعية المكوِّنة للدم من متبرع. يساعد الاختبار على دراسة التفاعل المناعي بين الطرفين، لكنه لا يتنبأ وحده بحدوث أي من هاتين المشكلتين أو بشدتهما.

لم يعد هذا الاختبار الخيار المعتاد لاختيار المتبرع في معظم المراكز؛ فقد أتاحت تقنيات تحديد HLA الجزيئية تقييمًا أكثر دقة واستخدامًا عمليًا للمطابقة. كما أن المستنبت يحتاج إلى خلايا حية وظروف مضبوطة ووقت للحضانة، وقد تتباين نتائجه بحسب طريقة التنفيذ.

مع ذلك، قد يُستخدم في مختبرات متخصصة لدراسة الاستجابة المناعية بين شخصين، أو ضمن الأبحاث المتعلقة بالزراعة وتحمل الطعم وتأثير العلاجات في نشاط الخلايا التائية. وقد يُطلب بصيغ معدلة للإجابة عن سؤال سريري أو بحثي محدد. لذلك من المهم معرفة سبب طلبه، وما القرار الذي قد يتأثر بنتيجته، بدل اعتباره شرطًا ثابتًا لكل عملية زراعة.

تبدأ الإجراءات عادةً بسحب عينات دم من الطرفين المراد دراسة التفاعل بين خلاياهما. ثم يفصل المختبر الخلايا أحادية النواة، التي تضم اللمفاويات وخلايا أخرى تساعد في عرض المستضدات. بعد ذلك تُزرع الخلايا وفق بروتوكول محدد، مع عينات ضابطة تساعد على التأكد من صلاحية التجربة وتفسير الاستجابة.

• في الاختبار أحادي الاتجاه، تُعالج خلايا أحد الطرفين لمنع تكاثرها مع الإبقاء على قدرتها على تحفيز خلايا الطرف الآخر.
• في الاختبار ثنائي الاتجاه، يمكن أن تستجيب خلايا الطرفين وتتكاثر، لذلك يعكس القياس تفاعلًا مشتركًا.
• تُحضن الخلايا عدة أيام، ثم تُقاس استجابتها بطريقة معتمدة لدى المختبر.
• قد يشمل القياس مقدار التكاثر أو مؤشرات التنشيط، وتُستخدم تقنيات مثل تتبع الانقسام بالتدفق الخلوي بحسب نوع الاختبار.

التعامل مع الخلايا لمنع تكاثرها، بما في ذلك استخدام التشعيع في بعض البروتوكولات، يحدث داخل المختبر فقط. لا يعني ذلك تعريض الشخص للإشعاع أو إعطاءه علاجًا. كما أن الوقت اللازم لإصدار التقرير يختلف بحسب البروتوكول وترتيبات نقل العينات وتشغيلها.

لا يتطلب سحب الدم لهذا الاختبار صيامًا في المعتاد، ما لم تكن هناك تحاليل أخرى تستدعي ذلك. وقد يحتاج المختبر إلى تنسيق مسبق لجمع عينتي المتبرع والمتلقي ونقلهما سريعًا، لأن حيوية الخلايا عامل مهم في موثوقية النتائج.

• أبلغ الفريق بجميع الأدوية، وخصوصًا مثبطات المناعة والكورتيزون والعلاجات التي تؤثر في اللمفاويات.
• اذكر وجود عدوى حديثة، أو علاج كيميائي، أو حالة صحية قد تغير وظيفة الجهاز المناعي.
• أخبر من يسحب العينة إذا كنت تستخدم مميعات الدم أو سبق أن أصبت بالإغماء عند سحب الدم.
• لا توقف دواءً أو تغيّر موعده من نفسك لتحسين نتيجة الفحص.

تقتصر المخاطر على مخاطر سحب الدم المعتادة، مثل ألم بسيط أو كدمة أو دوار عابر. والعدوى في موضع الإبرة نادرة عند الالتزام بإجراءات التعقيم. لا تُعاد الخلايا الممزوجة إلى جسم أي من الطرفين، ولذلك لا يسبب الاختبار نفسه رفضًا مناعيًا أو انتقال خلايا المتبرع إلى المتلقي.

قد يعرض التقرير مقدار تكاثر الخلايا أو نسبة الاستجابة مقارنة بعينة ضابطة، وقد يستخدم ما يُسمى مؤشر التحفيز. لا توجد قيمة طبيعية واحدة تصلح لجميع المختبرات والطرق. لذلك ينبغي قراءة النتيجة مع المجال التفسيري والبروتوكول المستخدم، وليس بمقارنتها عشوائيًا بنتيجة منشورة أو تقرير من مركز آخر.

الاستجابة المرتفعة تعني وجود تفاعل خلوي أكبر في ظروف الاختبار، لكنها لا تعني حتمية فشل الزراعة. كذلك لا تضمن الاستجابة المنخفضة توافقًا كاملًا؛ فقد تنتج عن تقارب مناعي، أو ضعف وظيفة الخلايا، أو تأثير الأدوية، أو انخفاض حيوية العينة. وقد تصبح النتيجة غير قابلة للتفسير إذا لم تحقق العينات الضابطة الاستجابة المطلوبة.

يحدد فحص HLA السمات المناعية الموروثة لدى المتبرع والمتلقي. أما فحص الأجسام المضادة الموجهة ضد HLA فيبحث عن أجسام مضادة قد تستهدف مستضدات المتبرع. وتتحرى المطابقة التصالبية، بالطرق المناسبة للحالة، تفاعل أجسام المتلقي المضادة مع خلايا المتبرع. تختلف هذه الفحوص عن المستنبت الذي يركز على الاستجابة الخلوية، ولا يحل أحدها تلقائيًا محل الآخر.

ناقش التقرير مع اختصاصي الزراعة أو المناعة إذا كانت النتيجة غير واضحة، أو طُلب تكرار العينة، أو قيل إنها قد تؤثر في اختيار المتبرع. اطلب توضيح ما إذا كان الفحص لأغراض سريرية أم بحثية، وكيف يرتبط ببقية التحاليل. لا تتخذ قرار قبول متبرع أو رفضه بناءً عليه وحده.

إذا كنت قد خضعت للزراعة، فاتصل بفريقك سريعًا عند ظهور حمى أو طفح جديد أو إسهال مستمر أو انخفاض ملحوظ في البول، ولا تنتظر نتيجة هذا الاختبار. أما ضيق التنفس الشديد أو ألم الصدر أو اضطراب الوعي فيستدعي رعاية طارئة. تبقى المتابعة السريرية والفحوص المناسبة لنوع الزرع أساس تقييم سلامتك ووظيفة الطعم.