اختبار زرقة النتروتترازوليوم ودوره في تقييم المناعة

يعتمد الفحص على مادة تُسمى النتروبلو تترازوليوم، تستطيع التحول إلى رواسب زرقاء داكنة داخل الخلايا عند اختزالها. يعرّض المختبر خلايا الدم البيضاء لمادة منبهة، ثم يبحث عن هذا التغير اللوني باستخدام المجهر. لذلك فهو اختبار وظيفي يراقب ما تفعله الخلايا، وليس مجرد تحليل يحصي عددها.

الخلايا المستهدفة أساسًا هي العدلات، وهي من خطوط الدفاع الأولى ضد البكتيريا والفطريات. عندما تبتلع هذه الخلايا ميكروبًا، تنشّط مجموعة من التفاعلات المعروفة بالانفجار التأكسدي، فتنتج مركبات تساهم في قتله. يعتمد ذلك على عمل مركّب إنزيمي يُسمى أوكسيداز NADPH، ويساعد اختبار NBT على كشف الخلل الشديد في هذا المسار.

مرض الورم الحبيبي المزمن اضطراب وراثي نادر يؤثر في عمل بعض الخلايا المناعية البالعة. تستطيع هذه الخلايا الوصول إلى الميكروبات وابتلاعها، لكن قدرتها على التخلص من أنواع معينة من البكتيريا والفطريات تكون ضعيفة بسبب خلل في إنتاج المركبات المؤكسدة.

قد يؤدي ذلك إلى عدوى متكررة أو عميقة، وإلى تجمعات التهابية تُسمى الأورام الحبيبية. وكلمة «ورم» هنا لا تعني سرطانًا؛ بل تشير إلى تجمع من الخلايا الالتهابية. تظهر الحالات غالبًا في الطفولة، لكن بعض الأشكال الأقل شدة قد لا تُكتشف إلا في سن أكبر. وقد يكون تعداد الدم طبيعيًا رغم وجود هذا الخلل الوظيفي.

لا يُطلب الاختبار عادةً بسبب نزلات البرد المعتادة وحدها، ولا يُستخدم كفحص روتيني لكل شخص يشعر بالتعب. يحدّد الطبيب الحاجة إليه وفق نوع العدوى وشدتها، ونتائج المزارع، والتاريخ الصحي والعائلي. ومن الأسباب التي قد تدفع إلى تقييم وظيفة العدلات:

• خراجات متكررة أو عميقة في الجلد أو الكبد أو الأعضاء الداخلية.
• التهابات رئوية شديدة أو متكررة، خاصةً عند وجود عدوى فطرية غازية.
• عدوى بميكروبات يرتبط تكرارها باضطرابات وظيفة الخلايا البالعة.
• التهابات مستمرة في العقد اللمفاوية أو العظام دون تفسير واضح.
• وجود قريب مصاب بمرض الورم الحبيبي المزمن أو تاريخ عائلي يثير الشك.
• تجمعات التهابية أو أعراض معوية مزمنة مع عدوى غير معتادة.

هذه العلامات ليست تشخيصًا بحد ذاتها؛ فقد تنتج عن أسباب أخرى أكثر شيوعًا. لذلك يبدأ التقييم بالفحص السريري، وقد يشمل تعداد الدم وفحوصًا مناعية أو ميكروبية أخرى قبل اختيار الاختبار المناسب.

لا يحتاج الفحص عادةً إلى صيام، إلا إذا طُلبت معه تحاليل أخرى تستلزم ذلك. أخبر الطبيب والمختبر بالأدوية والمكملات التي تستخدمها، وبأي عدوى حالية، أو علاج مناعي، أو نقل حديث للخلايا المحببة. قد تؤثر بعض الظروف في قراءة النتيجة أو في اختيار توقيت أخذ العينة.

لا توقف دواءً موصوفًا من تلقاء نفسك. ومن المفيد إحضار نتائج الفحوص السابقة وتقارير المزارع وتفاصيل العدوى المتكررة، إضافةً إلى معلومات عن الحالات المشابهة في العائلة. ولأن الاختبار يحتاج إلى خلايا حية تعمل بكفاءة، قد يلزم التنسيق مسبقًا مع مختبر متخصص لتجهيز العينة ونقلها سريعًا.

تُسحب عينة دم من وريد الذراع في أنبوب مناسب، ثم تُحضّر الخلايا وفق طريقة المختبر. تُقارن استجابة الخلايا بعد التنبيه باستجابتها في ظروف أخرى محددة، وقد تُستخدم عينة مرجعية للتأكد من صلاحية خطوات الفحص. بعد ذلك يقيّم المختص عدد الخلايا التي ظهرت داخلها الرواسب الزرقاء أو نسبتها.

سحب الدم نفسه يستغرق دقائق، لكن موعد صدور النتيجة يعتمد على توفر الفحص وإجراءات المختبر. وتشبه مخاطره مخاطر التحاليل الدموية المعتادة: ألم بسيط أو كدمة صغيرة مكان الإبرة، وأحيانًا دوخة عابرة. أما العدوى أو النزف الملحوظ فغير شائعين.

ظهور التلون الأزرق بصورة متوقعة

في الخلايا ذات الاستجابة السليمة، تتحول مادة الفحص إلى رواسب زرقاء بعد التنبيه. يشير ذلك إلى أن المسار الذي يقيسه الاختبار يعمل بدرجة متوقعة ضمن شروط الفحص. لكن النتيجة الطبيعية لا تعني أن جميع جوانب المناعة سليمة، ولا تستبعد كل اضطرابات وظيفة العدلات أو الحالات ذات النشاط المتبقي المحدود.

غياب التلون أو انخفاضه بوضوح

قد يدعم غياب التلون الأزرق أو انخفاضه الشديد الاشتباه في مرض الورم الحبيبي المزمن، خاصةً مع تاريخ سريري مناسب. ومع ذلك، لا تكفي قراءة منفردة لتأكيد التشخيص؛ إذ يجب التأكد من جودة العينة وصحة تنفيذ الفحص، ثم استكمال التقييم باختبارات أكثر حساسية عند الحاجة.

وجود مجموعتين مختلفتين من الخلايا

قد تظهر خلايا تستجيب وأخرى لا تستجيب، كما يمكن أن يحدث لدى بعض الإناث الحاملات للنوع المرتبط بالكروموسوم X. لكن اختبار NBT قد لا يكشف جميع الحاملات بدقة. ولا ينبغي استنتاج نمط الوراثة أو احتمال انتقال المرض للأبناء من هذا الفحص وحده.

يتأثر NBT بطريقة التحضير وخبرة قراءة الشرائح، وهو أقل قدرة على قياس الفروق الدقيقة في نشاط الخلايا مقارنةً بالتقنيات الأحدث. كما أن تأخر نقل العينة أو تراجع حيوية الخلايا قد يجعل النتيجة غير موثوقة. لذلك لا توجد نسبة واحدة تُفسَّر بمعزل عن طريقة المختبر ومجاله المرجعي.

يُفضَّل حاليًا في كثير من المراكز اختبار ثنائي هيدرورودامين، المعروف باسم DHR، باستخدام التدفق الخلوي. فهو يقيّم استجابة أعداد كبيرة من الخلايا، ويساعد على تمييز أنماط الخلل والنشاط المتبقي. ومع ذلك، له أيضًا اعتبارات تفسيرية؛ فبعض الاضطرابات الأخرى قد تعطي أنماطًا غير طبيعية تحتاج إلى فحوص تكميلية. وقد يُطلب التحليل الجيني لتأكيد السبب وتحديد النمط الوراثي.

احجز تقييمًا طبيًا إذا تكررت الخراجات أو الالتهابات الرئوية الشديدة، أو احتاجت العدوى مرارًا إلى دخول المستشفى، أو وُجد تاريخ عائلي لاضطراب مناعي وراثي. وتستدعي النتيجة غير الطبيعية مراجعة اختصاصي في المناعة السريرية، حتى لو لم تكن هناك أعراض حادة وقت التحليل.

اطلب رعاية عاجلة عند وجود صعوبة تنفس، أو تشوش، أو تدهور سريع، أو حمى مصحوبة بخمول شديد، خاصةً لدى شخص معروف بإصابته بخلل مناعي. لا تنتظر نتيجة الفحص لبدء تقييم عدوى خطيرة. وإذا تأكد المرض، يضع الفريق المختص خطة للوقاية من العدوى وعلاجها ومتابعة الالتهاب، وقد يناقش خيارات علاجية متخصصة وفحص أفراد الأسرة بحسب الحالة.