الكيمياء النسيجية المناعية: كيف تساعد في دقة التشخيص؟

الكيمياء النسيجية المناعية، وتُختصر بالإنجليزية إلى IHC، تقنية تُجرى على شرائح رقيقة من الأنسجة المأخوذة بخزعة أو عملية جراحية. تعتمد على أجسام مضادة مُحضَّرة مخبريًا ترتبط ببروتينات محددة تُسمى المستضدات. وبعد إضافة نظام للكشف، يظهر مكان الارتباط غالبًا على هيئة لون يمكن رؤيته بالمجهر.

لا ينظر اختصاصي علم الأمراض إلى وجود اللون فقط؛ بل يقيّم مكانه داخل الخلية، وشدته، ونسبة الخلايا التي تحمل العلامة، وتوزيعها داخل النسيج. وقد يكون وجود البروتين في النواة أو غشاء الخلية أو سائلها الداخلي ذا معنى مختلف، بحسب الواسم المستخدم والسؤال التشخيصي المطروح.

يبدأ تقييم معظم العينات بصبغات روتينية تُظهر شكل الخلايا وبنية النسيج. وعندما لا تكفي هذه الصورة لتحديد التشخيص بدقة، أو عندما يحتاج الطبيب معلومات تؤثر في العلاج، قد يضيف اختصاصي الأمراض صبغات مناعية مختارة. لذلك يُطلب الفحص للإجابة عن سؤال محدد، وليس بصورة عشوائية لكل عينة.

• تحديد أصل ورم ونوع الخلايا التي يتكون منها.
• المساعدة في التفريق بين أمراض تتشابه تحت المجهر.
• تصنيف بعض سرطانات الدم والغدد اللمفاوية ضمن تقييم متكامل.
• البحث عن مؤشرات قد تساعد في اختيار علاج معين.
• الكشف عن بروتينات مرتبطة ببعض الميكروبات في حالات مختارة.

وقد يُستخدم أيضًا في تقييم آفات غير سرطانية. أما أسباب الأمراض وعوامل خطرها، مثل التدخين أو العدوى أو الاستعداد الوراثي، فلا يحددها هذا الفحص بمفرده؛ لأنه يفحص علامات داخل النسيج، وليس جميع العوامل التي أدت إلى حدوث المرض.

تُطبَّق الكيمياء النسيجية المناعية على مقطع نسيجي يحافظ على ترتيب الخلايا وعلاقتها بالأنسجة المحيطة. وهذه البنية مهمة لمعرفة نمط النمو وموضع الخلايا غير الطبيعية. أما الكيمياء الخلوية المناعية فتُستخدم على مستحضرات خلوية، مثل خلايا مأخوذة بإبرة دقيقة أو موجودة في بعض سوائل الجسم.

تعتمد الطريقتان على مبدأ ارتباط الجسم المضاد بهدفه، لكن نوع العينة وطريقة تجهيزها يختلفان. وقد تُجمع الخلايا في كتلة خلوية تُعالَج بطريقة تشبه الأنسجة. يختار المختبر الأسلوب الملائم حسب كمية المادة المتاحة والغرض من الفحص، ولا تكون العينات المختلفة قابلة للاستبدال دائمًا.

الحصول على النسيج

تأتي العينة عادةً من خزعة بالإبرة، أو خزعة بالمنظار، أو استئصال جزء من نسيج أو عضو. وإذا كانت هناك عينة محفوظة مناسبة من إجراء سابق، فقد يمكن إجراء الصبغات عليها دون خزعة جديدة. لكن الطبيب قد يطلب عينة إضافية عندما تكون المادة قليلة أو غير ممثلة للمنطقة المطلوبة.

تجهيز الشرائح وصبغها

في الطريقة الشائعة، يُثبَّت النسيج لحفظه ثم يُضمَّن في الشمع ويُقطَّع إلى شرائح رقيقة. تُعالَج الشرائح لإظهار مواقع البروتينات، وتُضاف الأجسام المضادة وكواشف اللون. ويستخدم المختبر ضوابط مناسبة للتحقق من سلامة التفاعل، ثم يفسر اختصاصي الأمراض النتيجة مع الصبغات الروتينية.

غالبًا تُستخدم مجموعة من الواسمات بدلًا من واسم واحد؛ لأن بروتينًا معينًا قد يظهر في أكثر من نوع من الخلايا. وتُختار هذه المجموعة تدريجيًا بحسب النتائج، مما يفسر أحيانًا الحاجة إلى مراحل إضافية قبل إصدار التقرير النهائي.

لا يحتاج تلوين عينة محفوظة في المختبر إلى صيام أو استعداد بدني من المريض. أما التحضير للخزعة نفسها فيعتمد على موضعها وطريقة أخذها ونوع التخدير. أخبر الفريق الطبي عن الأدوية التي تستخدمها، خصوصًا مميعات الدم، وعن الحساسية واضطرابات النزف، ولا توقف أي دواء من نفسك.

اسأل كذلك عن طريقة العناية بموضع الخزعة وموعد استلام النتيجة. تختلف مدة الإنجاز بحسب تعقيد الحالة، وعدد الصبغات المطلوبة، والحاجة إلى إرسال العينة لمختبر متخصص. التأخر وحده لا يشير إلى خطورة التشخيص، وقد يعكس الحرص على استكمال الفحوص اللازمة.

قد يذكر التقرير أن واسمًا ما إيجابي أو سلبي، أو يصف نسبة الخلايا المصبوغة وشدة التلوّن. الإيجابية تعني اكتشاف الهدف وفق معايير الاختبار، ولا تعني تلقائيًا وجود ورم خبيث. والسلبية لا تنفي مرضًا في جميع الظروف، خصوصًا إذا كانت العينة صغيرة أو كانت جودة حفظ النسيج غير مناسبة.

بعض الفحوص لها أنظمة تقييم محددة تختلف باختلاف العضو والواسم. وقد توجد نتيجة حدودية تحتاج اختبارًا تأكيديًا. لذلك لا يصح تفسير علامة منفردة اعتمادًا على قائمة من الإنترنت؛ فالخلاصة التشخيصية تتكون من شكل النسيج، ومجموعة الصبغات، والتاريخ المرضي، ونتائج التصوير والفحوص الأخرى.

في بعض أورام الثدي، يُستخدم الفحص لتقييم مستقبلات الإستروجين والبروجستيرون وبروتين HER2، وقد تؤثر النتائج في ملاءمة العلاج الهرموني أو العلاج الموجّه. وبعض نتائج HER2 تحتاج تأكيدًا باختبار آخر يكشف تغيرات على مستوى الجين، بدل الاكتفاء بتقييم البروتين.

وفي أورام مختارة، قد يُطلب تقييم PD-L1 للمساعدة في قرارات تخص بعض العلاجات المناعية. كما قد يوجّه غياب بروتينات إصلاح عدم تطابق الحمض النووي إلى فحوص إضافية تتعلق بالعلاج أو باحتمال استعداد وراثي. لكن النتيجة لا تثبت وحدها وجود حالة موروثة، ولا تضمن الاستجابة لدواء معين.

تعتمد موثوقية النتائج على جودة العينة وتثبيتها، وصلاحية الكواشف، وطريقة القراءة. وقد تختلف البروتينات داخل أجزاء الورم نفسه، فلا تمثل خزعة صغيرة كل خصائصه. كذلك قد يحدث تلوّن غير نوعي أو فقدان لبعض العلامات، مما يستدعي إعادة الصبغ أو مراجعة العينة أو إجراء اختبارات مكملة.

الفحص المخبري نفسه لا يعرّض المريض لإشعاع ولا يتطلب حقن الأجسام المضادة في جسمه. المخاطر ترتبط بإجراء أخذ العينة، وقد تشمل الألم أو النزف أو العدوى، وتختلف حسب موضع الخزعة وطريقتها. يشرح الفريق الطبي هذه المخاطر قبل الإجراء وكيفية تقليلها.

راجع الطبيب الذي طلب الخزعة عند صدور التقرير لمناقشة التشخيص النهائي، وما إذا كانت هناك فحوص معلقة، وكيف ستؤثر النتائج في الخطة العلاجية. وإذا بدا التقرير غير حاسم أو لم يتوافق مع بقية الفحوص، فقد تكون مراجعة الشرائح لدى اختصاصي آخر مفيدة.

• اطلب تقييمًا عاجلًا بعد الخزعة إذا ظهر نزف لا يتوقف، أو ألم شديد متزايد، أو حمى مع احمرار وإفرازات من الجرح.
• اطلب المساعدة الطارئة عند حدوث ضيق تنفس أو إغماء بعد الإجراء.
• لا تبدأ علاجًا ولا توقفه بناءً على اسم واسم أو نتيجة منفردة دون مراجعة الطبيب.